是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù).

 

 

　　免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等.實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片.

 

　　其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本最常用、最基本的方法,對(duì)于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對(duì)照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中首選的組織標(biāo)本制作方法.

 

　　免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體.單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備.多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物.

 

　　均一性.一種單抗中,每個(gè)抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類.即單抗是一種純度很高的均一抗體.而從不同動(dòng)物,不同時(shí)期所得到的多抗,各有不同的化學(xué)組成.多抗是多種種類和亞類Ig的混合物.穩(wěn)定性.單抗的穩(wěn)定性較差,對(duì)PH變化敏感,對(duì)熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好.

 

　　特異性.單抗是單一地針對(duì)抗原的某一決定簇,所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時(shí),特異性強(qiáng),敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng),而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng).重復(fù)性.單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣.