細(xì)菌在使用過程中及傳代過程中,易受污染、變異甚至死亡,從而導(dǎo)致菌種的消亡,從而導(dǎo)致優(yōu)良菌種的流失。細(xì)菌保存的重要意義在于,要盡可能保持原菌的活性和穩(wěn)定性,保證菌種不死,不變,不受污染,以滿足研究、交換和使用等各方面的便利。細(xì)菌保存方法有哪些呢?
有的微生物一旦遭遇冷凍、干燥等處理,就會(huì)迅速死亡,因此在這種情況下,ATCC菌株只能采用傳代培養(yǎng)的方法進(jìn)行保存。菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)、保存等都需要定期進(jìn)行傳代培養(yǎng),這是微生物保存法中最基本的方法,如酸奶等常用菌種的保藏。培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分含量不宜過多,特別是碳水化合物含量應(yīng)盡可能地減少,以保證傳代期間培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的安全。一般情況下,培養(yǎng)溫度最好是在最適生長溫度以下。如果是產(chǎn)酸菌的話,應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入少量的碳酸鈣。
即便是微生物混懸在合適的溶液中也是如此。ATCC菌株常見的有保存方法有:
蒸餾水保存法:適用于霉菌、黃曲霉和大部分放線菌,其菌體懸浮于蒸餾水中,可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意防止水分蒸發(fā)。
糖液貯藏法:適用于酵母菌,如將其菌體置于10%的蔗糖溶液中貯藏,冷藏室可存放10年。另外,緩沖液、鹽、水等也可以用來保存。
凍干保存法:其原理是先冷凍微生物,然后利用其在一元態(tài)下去除水分。當(dāng)細(xì)菌去除大部分水分后,細(xì)胞的生理活動(dòng)就會(huì)停止,從而達(dá)到長期維持生命狀態(tài)的目的。本方法適用于噬菌體、立克次氏體等絕大多數(shù)微生物菌種的保存。