3M菌落總數(shù)測試片
1.操作方法
①未開封時，置于≤8℃冷藏，注意外包裝上的保存期限，打開包裝時，應(yīng)在室溫條件下。已開封的，應(yīng)用壓條或膠帶封口后，置于室溫，一個月內(nèi)用完。
②稱取樣品置于無菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯中，加入無菌稀釋液攪拌或均質(zhì)樣品，并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調(diào)pH至6.5~7.2。
注意：無菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液，這些稀釋液會抑制細(xì)菌的生長。
③將測試片置于平坦表面處，保持水平，揭開上層膜，移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下，盡量不要出現(xiàn)氣泡，切勿向下滾動上層膜。
④將壓板的圓形內(nèi)凹面朝下，放置在上層膜的正中央，然后輕輕壓下，使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)基面積上，切不可扭轉(zhuǎn)壓板。
⑤拿起壓板，靜置1min以上等待培養(yǎng)基凝固。然后測試片的透明面朝上，最多可疊放20片，置于36℃培養(yǎng)48小時，并保持培養(yǎng)箱的濕度。
2.判讀方法
①菌落總數(shù)測試片內(nèi)，含有一種紅色指示染劑，可以使菌落呈現(xiàn)紅色便于計數(shù)，計算所有紅色菌落，不論大小及顏色深淺。
②3M檢測片菌落計數(shù)的適宜計數(shù)范圍是25~250。
③測試片的計數(shù)面積約為20cm2。每一個黃色方框的面積是1cm2。當(dāng)菌落總數(shù)超過250個時，為了估計菌落數(shù)，可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框（1cm2）。計算平均菌落數(shù)，然后再乘以20可得到測試片上的菌落數(shù)。
④當(dāng)測試片上的菌落太多而無法進(jìn)行計數(shù)時，記錄為“TNTC”。
⑤有很高數(shù)量的菌落，使整個生長區(qū)域變成粉色，或僅僅在生長邊緣區(qū)域觀察到單個菌落，記錄為“TNTC”。
⑥有很高的菌落數(shù)量，并且有時菌落會出現(xiàn)分布不均勻的情況，記錄為“TNTC”。
⑦可以看到直徑較大的菌落，并且可以計數(shù)，但是仔細(xì)觀察時，會發(fā)現(xiàn)非常密集非常細(xì)小的菌落分布在計數(shù)區(qū)域內(nèi)，此時記錄為“TNTC”。
⑧很少數(shù)量的菌種，會將測試片上的培養(yǎng)基液化，在計數(shù)區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)一個粉紅色的液化區(qū)，此時不要記錄液化區(qū)內(nèi)的紅點，應(yīng)選擇沒有被液化區(qū)域內(nèi)的菌落進(jìn)行計數(shù)，選取沒有液化部分的幾個有代表性的小方格（1cm2）。計算平均菌落數(shù)，然后乘以20。得到結(jié)果。
⑨注意和樣品殘渣顆粒進(jìn)行區(qū)。有些樣品中會含有一些紅色的殘渣顆粒，菌落應(yīng)該是紅色規(guī)則的圓形，而顆粒的形狀是不規(guī)則的。如果樣品以紅色顆粒為主（比如辣椒粉），這類樣品的菌落總數(shù)檢測，不宜采用3M菌落總數(shù)測試片。
3M大腸桿菌/大腸菌群測試片
1.操作方法
操作方法與3M菌落總數(shù)測試片基本相同，只是不需要壓板，直接把1ml樣液加到中間紅色圓形區(qū)域內(nèi)，然后將上層膜輕輕放下，盡量不要產(chǎn)生氣泡。然后可以輕輕的轉(zhuǎn)動一下紙片，使樣液可以均勻地分布在中間紅色的圓形區(qū)域內(nèi)。
2.判讀方法
大腸菌群在紙片上呈現(xiàn)紅色菌落，緊貼著菌落有氣泡，大腸桿菌在紙片上呈藍(lán)色菌落緊貼菌落有氣泡。此時應(yīng)注意區(qū)分只有紅色或藍(lán)色菌落而沒有氣泡的情況，或者氣泡不是緊貼著菌落，或者只有氣泡無菌落生長，都不應(yīng)列入計數(shù)范圍。此外還應(yīng)區(qū)別樣品殘渣和目標(biāo)菌落。
